Q. standard curve그리기
답변 5 | tape | 2019.12.06 10:57
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x축이 OD값, y축이 CFU/mL인 E.coli의 standard curve를 만들려고 하는데 OD값을 언제까지 측정해야하나요??

24시간동안 1시간마다 측정을 계속해야하나요??

키워드: standard curve, E.coli
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A. 답변 (5)

growth curve를 작성하려면 48시간 정도 측정하면되고 측정 간격은 좁으면

좁을수록 좋지만 1시간 간격 보다 넓어도 무방합니다.

growth curve가 아니라 CFU/OD를 구하려면 긴 시간 배양하지 않고 log phase에

있는 균을 OD측정하고 여러 희석 배수로 희석하여 colony를 counting하면

CFU/OD를 구할수 있습니다.

SPEED (2019-12-06 11:27)

답변 주셔서 감사합니다ㅠㅠ

그럼  균을 stationary phase에 정지? 고정?시켜서 사용하여야 하나요??

그리고 stationary phase에 있을때 OD값이 일정한데

예를들어 stationary phase의 OD값이 0.5인데 OD 0.1일 때의 균수를 알고 싶으면 어떻게 해야하나요??

tape (2019-12-06 11:51)

- 그럼  균을 stationary phase에 정지? 고정?시켜서 사용하여야 하나요??

: 정지기가 아니라 mid-log 또는 log phase 균을 사용하는 것이 좋고 배양 중인

균을 바로 사용하면 됩니다.

고정 같은건 하지 않고 OD값과 희석해서 plate에 spreading하면됩니다.

- 그리고 stationary phase에 있을때 OD값이 일정한데

: OD가 일정하건 의미가 없고 배양 중에 일정 시점의 균을 사용하면 됩니다.

- 예를들어 stationary phase의 OD값이 0.5인데 OD 0.1일 때의 균수를 알고

싶으면 어떻게 해야하나요??

: 위의 방법으로 실험하면 CFU/OD가 계산됩니다.

생균수 측정을 한번 찾아보길 바랍니다.

SPEED (2019-12-06 12:37)

혹시 log phase의 E.coli를 centrifuging하여 두었다가 resuspend시켜서 다시 plating하면서 OD를 측정해도 괜찮을까요??ㅠㅠ

tape (2019-12-06 21:42)

균체 흡광도는 균체의 크기와 상태가 중요한 factor 값입니다.

따라서 가능한 배양중인 균을 사용해서 바로 측정하는 것이 좋습니다.

생균수 cfu와 OD와의 오차가 발생하지 않게 하는 것이 가장 좋습니다.

배양 중인 균을 어느정도 시간이 지나서 측정해도 괜찮을 지는 보관 시간별로

측정해봐야 알수 있습니다. 

SPEED (2019-12-07 00:00)
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