Q. 같은 Target이더라도 제조사마다 자기 샘플에 맞는 ELISA kit가 있을까요?
답변 2 | hyunjin2009 | 12.03 22:01
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서울에 모 석사생입니다.

ELISA 실험을 하고 있는데요. Standard는 잘 나오지만 계속 sample값이 거의 blank에 가깝게 측정되어서 질문을 드리게 되었습니다.

희석 배수나 기타 실험 과정에서 문제는 없어 보이구요.  샘플에 문제도 없어 보입니다.

하나 의심되는 점이 있는데요. 혹시 같은 target을 검출하는 Kit지만 각 회사별 항체가 조금씩 다르기 때문에(어떤 epitope에 binding하는지는 조금씩 다를 것으로 생각합니다) 제가 가지고 있는 샘플에 항원항체 반응이 약하거나 아예 결합하지 않을 수도 있지 않을까 하는 생각이 들었습니다.

더군다나 제가 분석하고자 하는 target은 기니피그의 IgE로, mouse나 human처럼 흔하게 분석하는 target도 아니라서 더욱 업체측에서 standarization이 덜 되지 않았을까 하는 생각도 듭니다..

들은 이야기이긴 하지만 자기의 샘플에 맞는 kit를 찾기 위해서 여러 회사의 ELISA kit를 소량씩 구매해서 테스느 해보았다는 말을 들은적이 있어서요.

혹시 이와 같은 경험이 있으신 연구자분 계신지요?

키워드: ELISA, IgE
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A. 답변 (2)

ELISA kit나 WB의 ab의 경우 항상 사용하는 제품만 사용을 하지만 현재 kit는

문제가 없어 보입니다.

STD가 기니피그 intact IgE이 때문에 epitope 문제는 아닐겁니다.

실험 시료에 IgE가 있다면 kit에 사용한 ab가 mono-, poly- 관계없이 epitope을

잡을 것으로 보입니다.

 

SPEED (2019-12-03 22:21)
kit (같은 제조사의 다른제품)마다 단백질이 측정가능한 범위가 있는데. .
그 범위 안에 못들어오는 정도의 IgE발현인건 아닐까요..
실험전반적인 건 모르지만 IgE라면 알러지 관련되어 유발이 되어야 ELISA에서 Standard안에 들어올 것 같습니다
alnlbook (2019-12-05 02:10)
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