Q. 적혈구 정량분석법에 대해 질문이 있습니다
알 INRI (일반인)  |  2020.12.03 13:35

안녕하세요 고등학교 과제연구에서 헤모글로빈을 분광 광도계로 측정하려고 계획한 실험 중 문제가 생겨 질문 드립니다.

실험 과정 중

Imai-Nose법에서 5 mL 정제수를 첨가하여 혈액응고반응을 정지시킨 시료에 5분 후, 혈전을 제외하고 정제수에 의해 용혈된 적혈구가 있는 상층액을 채취한다.다시 정제수 5 mL를 첨가하여 잔존하는 적혈구 용혈용액를 채취한다. 

이를 1회 더 반복한 후, 분광광도계에 용혈용액을 분주한다. 

적혈구가 용혈되면 적혈구 내부에 있던 헤모글로빈이 방출되는데, 이 헤모글로빈을 분광 광도계를 이용하여 540 nm에서의 흡광도를 측정하여 적혈구를 정량분석한다

여기서

1."혈전을 제외하는 방법"

2. "용혈된 적혈구가 있는 상층액을 채취하는 방법"

="잔존하는 적혈구 용혈용액을 채취하는 방법"

3. "이를 1회 더 반복"한다는 건 어디서 부터 반복하는건가요?

​​​​​​​

답변해주시면 정말 감사하겠습니다 ㅜㅜ 

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A. 답변 (1)
이렁  |  2020.12.03 18:56

생물학 실험이라 직접 해 본 적은 없지만...

실험메소드 설명상

 

1.

반응 후에 상층과 하층으로 분리되고, 그 중 혈전이 하층으로 가라앉는 듯 합니다. 굳이 혈전을 직접 제거하는 것이 아닌 거죠.(만약 반응만으로 상하층 분리가 안 된다면 아마 원심분리를 해야할 겁니다.)

 

2.

1번에서 답드렸 듯, 상층과 하층으로 분리되었으니 상층 부분만 채취하면 되겠지요. 대부분 상층액만 채취할 때는 rinse 작업없이 피펫으로 채취하는 경우가 많습니다. 상하층 분리가 뚜렷하고 다시 섞이지 않을 때는 그냥 따라서 채취할 수도 있습니다.

 

3.

다시 5mL 정제수를 넣으라 했으니 처음 정제수를 넣었던 부분부터 반복하면 되지요. 5mL 정제수를 넣고 5분간 정치 후 상층액만 채취하는 걸 1번 더 반복하세요.

 

 

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<본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, BRIC에서 추가적인 검증과정을 거친 정보가 아님을 밝혀드립니다.>
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