Q. homologous recombination에서 arm 방향?
알 생공생공생 (대학원생)  |  2020.12.03 06:35

안녕하세요 고수님들. cloning 관련 질문이 있습니다.

보통 homologous recombination을 위한 vector를 설계할때

both side of gene border 일부분을 arm으로 해서 2개를 집어넣게 되는데요,

이때 양 arm의 orientation이 같아야 하나요?(direction)

 

CRISPR cas9으로 DSB후에 homologous recombination할때

어떤 gene을 Knock-in하는 경우에 arm 순서에 따라서 up/down stream 방향이 정해진다는 것은 알고있는데

arm의 각 orientation의 영향은 모르겠습니다.

 

gene이랑 orientation을 맞춰서 제한효소 4개로 (arm 하나당 2개씩)

directional cloning 해야 하는건지, 혹은 신경쓰지 않고 그냥 cloning 해도 상관없는지 궁금합니다.

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A. 답변 (1)
SPEED  |  2020.12.03 10:00
채택답변

- 이때 양 arm의 orientation이 같아야 하나요?(direction)

: 네.

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