Q. 식물 DNA pcr
알 뿌이뿡 (대학생)  |  2020.12.02 06:35

안녕하세요

식물 형질전환 실험을 진행하고 있습니다

현재 실험단계가  절편체로부터 형성된 캘러스 수준인데

이마저도 캘러스가 많지않습니다

 

알아보기론 protoplast를 사용해서도 pcr을 진행을 하던데

극소량의 callus를 사용해서 pcr도 가능한 방법이 있을까요?ㅜㅜ

 

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A. 답변 (2)
SPEED  |  2020.12.02 09:38
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극소량이라면 어느정도 양인가요?

callus로 부터 RT-PCR도 하지만 추출할 양은 되어야 합니다.

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느림보  |  2020.12.02 22:14
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그 양이 DNA를 뽑아 정제할 정도가 안된다면 direct PCR 방법을 응용하면 됩니다. 세포수가 1,000개 정도면 몇번 PCR하기에 충분한 양이 됩니다. 적당한 부피 20-50mM NaOH에 풀고 10분 정도 끓인 후 바로 PCR하세요. 가열은 Pcr 기기를 이용하면 됩니다.
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