Q. 왕초보 배지만들기
초보자  |  2009.11.25 05:43
배지를 만들다가 막혀서 그러는데요 ....ㅠㅠ

원래 배지조성에 500ml - 5g의 glucose가 들어갑니다

그런데 glucose는 autoclave를 하지 않고
따로 filteration을 해서 배지 붓기 전에 넣어주는 것으로 알고있는데요 ....

50%로 만들어서 넣어야 한데요

1) 그럼 이때 10ml에 5g을(50% glucose 만듦) 녹여 filteration 한 것을 attoclave가 끝난 플라스크에 그냥 넣어주면 되는건가요 ?

아니면 처음부터 나중에 들어갈 10ml (glucose) 을 빼고 490ml 을 만들어서 배지를 만들어 autoclave를 해준 후에 10ml의 glucose 를 넣어주는건가요 ?

2) 5g의 glucose 파우더를 10ml 에 녹여 필터를 하면 정확히 10ml 이 아니라 약간의 loss가 생기진 않나요 ? loss가 생긴것을 무시하고 넣어도 되는 건가요 ?


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위와 같은 맥락의 질문인데 ....

Glucose sol. (2.5%, sterile-filgered)              10.00ml

이것을 만들때 100ml 에 2.5g을 녹인 후 필터레이션한 것을 10ml  넣으란 얘기 맞는거죠 ?

제가 너무 초보라 .....
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A. 답변 (1)
엘피스  |  2009.11.25 12:48

배지에 조금 더 들어가고 덜 들어가고는 문제가 되질 않습니다만, 그래도 정확해야 하니,

10ml에 5g을 녹인것이 50%가 아닙니다. Glucose와 물의 양을 합쳐 최종 10ml이 되어야 50%입니다. % 농도로 시약을 만드는 경우에는 항상 염두에 두어야 하는 것이, 용질을 volume을 고려해야 한다는 것입니다. 5-6ml의 물에 5g을 녹이고 최종 10ml 이 되도록 물을 부어 맞춰주어야 한다는 것입니다.

10ml을 filtering하면 당연히 loss가 있습니다. 이 loss를 무시하는 것은 실험자의 맘이겠지만 저같으면 조금 더 넉넉히 만들어 최종 10ml을 정확히 맞춰줄 것입니다.

역시 같은 맥락에서 최종 배지의 volume도 glucose용액을 넣은 후 500ml이 되어야 합니다.

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